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回歸熱疏螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒對(duì)外源性干擾因素進(jìn)行簡(jiǎn)要說(shuō)明：

（1）標(biāo)本溶血 要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其具有類過(guò)氧化物的活性，因此，在以辣根過(guò)氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中，如果血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相，從而與后面加入的底物反應(yīng)顯色。

（2）標(biāo)本被細(xì)菌污染 標(biāo)本的采集及血清分離要注意盡量避免細(xì)菌污染。細(xì)菌菌體中除可能含有內(nèi)源酶對(duì)測(cè)定產(chǎn)生非特異性干擾外，還可能對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用。另外標(biāo)本在保存中出現(xiàn)渾濁或絮狀物時(shí)，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。

（3）標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng) 標(biāo)本在低溫下保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，IgG可聚合成多聚體，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底加深、甚至出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。通常情況下血清標(biāo)本可在2～8℃下保存l周，冷凍保存時(shí)間會(huì)更長(zhǎng)，但對(duì)于抗體或抗原含量低的標(biāo)本而言，則可能會(huì)因抗體掉價(jià)、抗原分解而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

（4）ELISA試劑盒標(biāo)本凝固不全 血液通常在采集后半小時(shí)后開(kāi)始凝固，18～24h*凝固。如果在血液未凝固時(shí)即離心分離血清，則可因纖維蛋白原非特異吸附于微孔而造成假陽(yáng)性結(jié)果。為了縮短標(biāo)本處理時(shí)間，可以在離心前將血液標(biāo)本置于溫箱中溫育或者采用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽┮约铀傺宓姆蛛x。

（5）冷凍保存標(biāo)本避免反復(fù)凍融 標(biāo)本的反復(fù)凍融會(huì)因其所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，使抗體效價(jià)跌落從而引起假陰性結(jié)果，ELISA試劑盒所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝凍存。此外，標(biāo)本在凍存時(shí)會(huì)因蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，因此重新融解的標(biāo)本必須混勻，但不要進(jìn)行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒即可。 

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